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荧光素-赖氨酸-葡聚糖,FITC-lysine-dextran的合成路径与关键控制参数
发布时间:2025-12-24     作者:wyh   分享到:

产品名称:荧光素-赖氨酸-葡聚糖,FITC-lysine-dextran的合成路径与关键控制参数

一、合成路径与关键控制参数

1. 合成步骤

步骤1:FITC-赖氨酸偶联

条件:FITC溶于DMSO(1 mM),与赖氨酸(过量1.5倍摩尔比)在磷酸盐缓冲液(pH 9.0)中避光反应4小时,温度25℃。

纯化:透析(截留分子量1 kDa)去除未反应FITC,C18反相HPLC纯化,纯度≥98%。

步骤2:葡聚糖功能化

羧基化修饰:葡聚糖(分子量10-200 kDa)与氯乙酸在NaOH溶液中60℃反应12小时,生成羧甲基葡聚糖(CM-Dextran)。

活化与偶联:CM-Dextran经EDC/NHS活化(摩尔比1:3:3),与FITC-赖氨酸在MES缓冲液(pH 6.0)中反应24小时,形成FITC-Lysine-Dextran。

步骤3:纯化与表征

纯化:尺寸排阻色谱(SEC)分离均一性组分,超滤浓缩(截留分子量10 kDa)。

表征:质谱(MS)确认分子量,¹H-NMR验证硫脲键及酯键特征峰,荧光光谱检测发射波长,动态光散射(DLS)测定粒径(约10-50 nm)。

2. 关键控制参数

pH与温度:活化阶段pH 4.5-6.0(避免EDC水解),偶联阶段pH 6.5-7.5(平衡氨基活性);反应温度25-37℃,避免高温导致荧光淬灭或葡聚糖降解。

溶剂体系:DMSO/水混合溶剂(体积比1:1)溶解FITC,水相反应添加0.1% BSA防止聚集;无水条件用于EDC/NHS活化。

摩尔比与催化剂:FITC:赖氨酸=1:1.5,EDC:NHS=1:1.2;DMAP催化酯化反应,CuSO₄/抗坏血酸钠用于点击化学优化。

二、特性与应用优势

光学性能:FITC荧光稳定,适用于荧光显微镜、流式细胞术及活体成像;葡聚糖的羟基可进一步偶联靶向配体(如抗体)或治疗分子。

生物相容性:葡聚糖基载体延长循环时间,减少免疫原性;赖氨酸的生物降解性支持体内安全代谢。

应用领域:

生物成像:追踪细胞内吞、肿瘤靶向及药物释放动态。

药物递送:包裹化疗药(如阿霉素)或核酸药物,实现靶向释放。

诊断试剂:结合生物素-亲和素系统(BAS)用于ELISA、免疫组化,提升检测灵敏度。

材料科学:修饰水凝胶、纳米颗粒或生物传感器,增强荧光响应性。

荧光素-赖氨酸-葡聚糖,FITC-lysine-dextran

关于我们:

西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。


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