产品名称：Biotin-FAPI-4的合成逻辑与关键技术

1. 关键合成技术

化学偶联反应

酰胺键形成：在EDC/NHS活化体系下，生物素NHS酯与FAPI-4的氨基反应，形成稳定偶联产物，反应条件优化（pH 7.0-8.5，4-25℃，1-4小时）以平衡偶联效率与活性保留。

点击化学：若FAPI-4引入叠氮/炔烃基团，可通过铜催化叠氮-炔烃环加成（CuAAC）或无铜SPAAC实现高效、特异性偶联，减少副反应。

酶切连接子：引入二肽（如Val-Cit）或四肽（如Gly-Gly-Gly-Gly）作为可酶切连接子，支持在溶酶体或肿瘤微环境中可控释放活性分子。

纯化与质控工艺

色谱纯化：采用反相HPLC（C18柱梯度洗脱）、凝胶过滤色谱（GFC/SEC）去除游离生物素、未反应FAPI-4及副产物，纯度≥95%，PDI≤1.05。

结构验证：质谱（MS）确认分子量，NMR验证共价连接位点，SDS-PAGE或电泳分析分子量分布。

内毒素与安全性：鲎试剂法验证内毒素含量≤1 EU/mL，细胞毒性试验确认生物相容性（IC50>100 μM）。

2. 功能验证与质量控制

靶向活性验证

FAP结合能力：通过流式细胞术、共聚焦显微镜验证FAPI-4与FAP阳性细胞（如肿瘤相关成纤维细胞）的结合效率（≥80%），竞争性实验确认结合可饱和性。

生物素-链霉亲和素系统：通过亲和层析或ELISA验证生物素与链霉亲和素的结合能力，确保信号放大效率≥10倍。

荧光/放射性标记验证

荧光性能：若偶联荧光染料（如Cy5、AF647），需验证激发/发射波长、量子产率及光稳定性，确保信号强度与保真度。

放射性核素标记：若用于PET/SPECT成像，需验证核素（如⁶⁸Ga、¹⁸F）的标记效率、稳定性及体内分布特性。

稳定性管理

储存条件：冻干粉-20℃避光保存（有效期≥1年），溶液状态2-8℃避光，避免反复冻融；添加抗氧化剂（如抗坏血酸）防止氧化降解。

加速稳定性试验：40℃/75%湿度条件下考察3个月，监测荧光强度、生物活性及分子量变化，确保长期储存稳定性。

关于我们：

西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有：近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二影产品，荧光蛋白及荧光探针等，欢迎咨询。

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