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Cholera Toxin Subunit B, CF®568的挑战与注意事项

发布时间：2026-01-06 作者：wyh 分享到：

产品名称：Cholera Toxin Subunit B, CF®568的挑战与注意事项

1. 合成与纯化挑战

合成优化：

活化条件：EDC/NHS活化需在低温（4℃）下进行，避免副反应（如染料自聚合）；反应时间需精确控制（1-2小时），防止过度偶联导致CTB活性丧失。

纯化策略：凝胶过滤色谱（如Superdex 200）分离未反应染料与偶联产物；离子交换色谱去除带电杂质；反相HPLC监测563 nm吸收峰确认纯度。

质量控制：MALDI-TOF质谱验证分子量及偶联度；SDS-PAGE分析蛋白完整性；荧光光谱确认发射峰位置及强度。

副产物控制：

水解风险：NHS酯在潮湿环境中易水解，需在无水条件下操作，使用新鲜配制的活化剂。

自交联抑制：添加过量CTB或使用低浓度染料减少自交联副产物，确保产物均一性。

2. 应用挑战与注意事项

生物医学应用限制：

细胞毒性：高浓度CF®568-CTB可能诱导细胞凋亡，需通过MTT实验验证细胞存活率；活细胞实验需控制染料浓度（＜10 μg/mL）。

背景干扰：581 nm发射波长与细胞自发荧光（如NADH）部分重叠，需优化成像参数（如共聚焦显微镜的针孔大小、激光功率）以降低背景噪声。

光漂白控制：长时间成像需添加抗氧化剂（如维生素C）或使用低光强，延长荧光信号持续时间。

操作与储存：

储存条件：-20℃避光、干燥保存，避免反复冻融；现配现用，防止荧光淬灭或蛋白降解。

溶解与稀释：使用无血清培养基或PBS溶解，避免金属离子（如Ca²⁺、Mg²⁺）影响CTB活性；稀释时需缓慢混合，防止局部浓度过高导致沉淀。

安全防护：操作时佩戴防护装备（手套、护目镜），避免接触皮肤/眼睛；废弃物按化学/生物危害处理。

Cholera Toxin Subunit B, CF®568

关于我们：

西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有：近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二影产品，荧光蛋白及荧光探针等，欢迎咨询。