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LA-PEG-Biotin,生物素-PEG-硫辛酸的功能验证
发布时间:2026-01-14     作者:wyh   分享到:

产品名称:LA-PEG-Biotin,生物素-PEG-硫辛酸的功能验证

1. 生物素(Biotin)活性验证

链霉亲和素结合实验

ELISA法:将生物素标记的LA-PEG-Biotin固定于微孔板,加入链霉亲和素-HRP(辣根过氧化物酶)偶联物,通过底物显色定量结合效率,验证生物素的高亲和力(Kd≈10⁻¹⁴ M)。

荧光标记结合实验:使用Cy5或FITC荧光标记链霉亲和素,与LA-PEG-Biotin修饰的纳米颗粒共孵育,通过荧光显微镜或流式细胞术检测荧光信号,评估靶向结合能力。

表面等离子体共振(SPR):实时监测生物素与链霉亲和素的结合动力学参数(如结合速率常数kon、解离速率常数koff),确认特异性结合能力。

生物分子标记应用

细胞表面标记:将LA-PEG-Biotin与链霉亲和素修饰的抗体(如抗CD44)结合,用于标记肿瘤细胞或免疫细胞,通过荧光成像验证靶向标记效果。

生物传感器构建:固定生物素化探针(如DNA、抗体)于传感器表面,利用链霉亲和素介导的信号放大,检测目标分子(如肿瘤标志物、病原体抗原)。

2. PEG功能验证

水溶性及生物相容性

溶解性测试:在PBS或水溶液中测定LA-PEG-Biotin的溶解度,与未修饰的硫辛酸对比,验证PEG提升水溶性的效果。

细胞毒性实验:采用MTT法或CCK-8法,在HEK293、HeLa等细胞系中评估细胞存活率,确认PEG降低免疫原性、提高生物相容性的能力。

抗蛋白质吸附与循环时间

蛋白质吸附实验:将LA-PEG-Biotin修饰的纳米颗粒与BSA(牛血清白蛋白)共孵育,通过BCA蛋白定量法检测吸附量,验证PEG的抗蛋白质吸附特性。

体内药代动力学:在小鼠模型中静脉注射LA-PEG-Biotin修饰的纳米载体,通过ELISA或LC-MS测定血浆半衰期,评估PEG延长循环时间的效果(通常可达24-48小时)。

3. 硫辛酸(LA)功能验证

抗氧化活性

自由基清除实验:采用DPPH自由基清除法或ABTS法,测定LA-PEG-Biotin对自由基的清除率,与纯硫辛酸对比,验证其抗氧化能力。

细胞氧化应激模型:在H₂O₂诱导的氧化应激细胞模型中,检测LA-PEG-Biotin对细胞存活率、ROS(活性氧)水平及抗氧化酶(如SOD、GSH)活性的影响。

表面修饰能力

金纳米颗粒修饰:将LA-PEG-Biotin与金纳米颗粒共孵育,利用硫辛酸的二硫键(-S-S-)或羧基(-COOH)反应,通过TEM(透射电镜)观察修饰效果,或通过紫外-可见光谱检测表面等离子体共振峰变化。

量子点功能化:将LA-PEG-Biotin修饰于量子点表面,通过荧光光谱验证其稳定性及生物相容性,用于细胞成像或生物传感。

LA-PEG-Biotin,生物素-PEG-硫辛酸

关于我们:

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