产品名称:ATTO 520 carboxylic acid,863655-50-9,AT520 COOH,AT520羧酸的操作规范与储存
一、储存条件:低温避光,防潮防氧化
温度与避光:需-20℃避光干燥保存,运输时溶剂无水且室温运输,收到后立即转移至-20℃环境。储存稳定期至少3年,需防潮防光,避免反复冻融或溶解。
包装要求:建议分装使用,避免频繁开瓶导致潮解;储存容器需密封,可充氮气防氧化。
特殊提示:pH>7时可能形成无色假碱(可逆反应,不影响偶联),但需避免高pH(>8)环境以防降解。
二、操作规范:精准调控反应参数
缓冲体系与pH:
最佳反应pH 6.5-7.5(如PBS、HEPES缓冲液),避免Tris/甘氨酸等含游离胺的缓冲液;可添加0.1-0.5 mM EDTA螯合金属离子,减少氧化干扰。
反应后需通过凝胶过滤(Sephadex G-25)、超滤(10-30 kDa截留)或透析纯化,去除游离染料及副产物,降低背景信号。
温度与时间:
室温(20-25℃)下反应30-60分钟为标准流程,低温(4℃)可延长至2-4小时以减少非特异性结合,避免高温(>37℃)引发蛋白变性或染料降解。
动态追踪场景(如活细胞成像)需控制反应时间≤30分钟,减少细胞损伤。
摩尔比控制:
染料与目标分子(如抗体、蛋白)摩尔比通常为2-5:1,通过紫外光谱法(A280蛋白吸收与AT520特征峰A516吸光度)计算F/P值,确保标记密度适中,避免过度标记导致蛋白聚集或活性丧失。
三、光谱特性与应用场景
光学参数:激发波长510-535 nm(适合514 nm氩离子激光器),发射波长约538 nm,斯托克斯位移大(约28 nm),减少激发光干扰,信噪比良好。
应用场景:
生物标记:标记抗体、核酸探针(如FISH)、蛋白质,用于免疫荧光、蛋白质相互作用研究及细胞骨架动态追踪。
体内成像:肿瘤靶向药物分布监测、组织代谢动态过程分析。
诊断试剂:荧光免疫检测(FLISA)、多色共定位(与AF350/AF488等无串扰),支持4通道以上同步成像。

关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司经营的产品种类包括有:近红外荧光染料、点击化学产品、合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯,二氧化硅及介孔二影产品,荧光蛋白及荧光探针等,欢迎咨询。
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