近年来,量子点在基因分析、免疫分析、微生物检测等方面得到应用。将链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点分别引入到基因芯片技术与聚合酶链反应技术之中,建立了链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测平台,
本文的研究内容主要包括以下几个环节:
1.链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测系统的优化研究
链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记取特定浓度的链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点与寡核苷酸芯片的探针阵列区域在室温下孵育--定时间。链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记后的芯片的处理方法将标记后的寡核苷酸芯片放入以下洗液中分别漂洗特定的时间。
链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片杂交体系的优化
(1)杂交液的选择
以金黄色葡萄球菌为例,比较了进口杂交液,与自行配制杂交液的杂交情况。
(2)杂交条件的优化
对影响寡核苷酸芯片杂交的4个主要因素杂交温度、杂交时间、洗涤条件、链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点浓度进行了选择优化,采用正交设计来安排实验。
2。链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测系统的效能评价;
通过实验研究发现经过量子点的标记之后,得到相应的杂交图谱。归纳杂交图,得到量子点标记的基因芯片检测食源性致病细菌的**杂交图谱。图10给出的图片是扫描程序生成的原始图像。程序自动将单色荧光信号转换为代表不同荧光强度的不同颜色,图像中荧光强度与颜色的对应关系由弱到强的依次是黑、蓝、绿、黄、红、白。
3。链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测系统初步应用。
链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点作为荧光标记物质的基因芯片技术方法,为敏感和特异地检测食品样本中可能存在的致病细菌,提供了一条新的途径,为基因芯片技术检测致病细菌,增添了新的内容。
以链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点做为标记物质的基因芯片技术,目前的检测对象还主要是集中在标准细菌菌株,和食品中分离菌株的纯培养,由于一些客观条件的限制,对建立的方法大规模验证,还没有全面展开。我们对链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片的重复性也进行了评价,结果显示,链酶亲和素修饰的CdSe/ZnS量子点标记的基因芯片检测平台重复性良好。
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以上资料来自小编axc,2022.03.08
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