标记基因目的是为检测目的基因是否成功导入，由于一般都是有“鸟枪法”导入的目的基因，所以成功率并不是很高,目的基因的检测和筛选就显得很有必要。

　　例如：大肠杆菌的某种质粒具有青霉素抗性基因，当这种质粒与外源DNA组合在一起形成重组质粒，并被转入受体细胞后，就可以根据受体是否吸饱具有青霉素抗性来判断受体细胞是否获得了目的基因，当人们用选择培养基(比如含有青霉素的培养基)，来培养受体细胞时，能够在培养基中存活下来的受体细胞就可以认为是成功的导入了外源DNA，标记基因就起作用了。

　　扩展资料

　　理想的报告基因通常具备如下基本要求：

　　1、受体细胞中不存在相应内源等位基因的活性;

　　2、它的产物是**的，且不会损害受体细胞;

　　3、具有快速、廉价、灵敏、定量和可重复性的检测特性。目前常用的报告基因有氯霉素乙酰转移酶基因(cat)、荧光素酶基因(luc)、β-葡萄糖苷酸酶基因(gus)等。

　　荧光标记所依赖的化合物称为荧光物质。荧光物质是指具有共轭双键系统化学结构的化合物。当它们被紫外线或蓝紫光照射时，它们可以被刺激成刺激状态。当基态从刺激状态恢复时，它们会发出荧光。荧光标记技术是指利用荧光物质的共价组合或物理吸附在所需研究分子的某个基团上，利用其荧光特性提供被研究对象的信息。荧光标记的无放射性污染、操作简单等优点，使得荧光标记在许多研究领域得到广泛应用。

　　荧光标记物质也广泛应用于蛋白质功能研究、**筛选等领域。人们使用荧光标记肽来检测目标蛋白的活性，并将其开发的高通量活性筛选方法应用于**筛选和**开发(如各种激酶、磷酸酶、肽酶等)。因此，多肽的荧光装饰也是多肽合成领域的重要组成部分。

　　以下是一些常用的多肽装饰荧光材料：

　　以下是一些荧光物质的激发光波长和发射光波长：

　　1.FITC修饰

　　异硫氰酸荧光素(FITC)活性高。一般来说，在固相合成过程中引入这种荧光基团比其他荧光素更容易，在反应过程中不需要添加活化试剂。

　　FITC修饰的多肽通常有两种形式：

　　(1)将FITC连接到整个肽链的末端，并在FITC之前连接到一分子ACP(6-氨基己酸)，也称为烷基间隔器。在反应中，FITC与肽链上暴露的-NH2反应提供了六个碳直链空间，大大降低了反应的空间位阻，提高了反应效率，降低了反应难度。其次，FITC还与肽结构中的-SH、侧链-NH2反应，ACP的加入也降低了这种副反应的可能性。此外，当多肽在酸性环境条件下切割时，在N端连接到FITC的多肽需要通过环化形成荧光素，这通常伴随着最后一个氨基酸的切除，而烷基间隔器ACP的访问避免了这种情况。

　　(2)整个肽中的Lys侧链连接到FITC，Lys侧链是终端为-NH2的四碳直链烷基，直接起到降低空间位阻的作用。这种装饰可以灵活地在整个肽的任何位置进行FITC装饰，而不仅限于终端。

　　两种形式的FITC修饰多肽具有操作简单、成功率高、分离纯化方便等优点。

　　2.AMC修饰

　　7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)是一种广泛使用的荧光标记试剂，如酶的痕量测定、酶的识别、激光染料的制备等。此外，C端用香豆素修饰的泛素分子也是研究蛋白质泛素过程的重要探索。

　　与其他荧光染料不同，AMC修饰多肽分子从C端进行：(1)AMC与肽链C端的**个氨基酸反应;(2)固相合成整个肽链(从**个氨基酸开始)，保留整个肽链的侧链保护基和最后一个氨基保护基;(3)液相缩合AA-AMC和全保护肽链;(4)切除保护基，完成肽链的装饰。

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