以下是关于荧光标记的葡聚糖、菊粉和透明质酸钠三种多糖的技术介绍,适用于科研实验、成像示踪、细胞摄取研究等领域:
我们提供以下定制服务:
分子量定制(可降解)
指定荧光团波长(FITC, Cy3, Cy5, Cy7, AF488, AF647)
标记度控制(DOF)
表征报告(UV、Fluorescence、NMR、HPLC)
提供冻干粉或溶液形式
一、荧光标记葡聚糖(Fluorescent Dextran)
【基本信息】
葡聚糖(Dextran)是一种由葡萄糖单位组成的中性多糖,常见分子量有10kDa~2MDa,良好的水溶性和生物相容性使其广泛用于细胞示踪、血管通透性研究、载体模型等。
【标记技术】
葡聚糖分子含大量羟基(–OH),可通过以下方式标记荧光探针:
1. 还原端标记法
原理:葡聚糖还原端的醛基与荧光胺(如 2-AB、2-AA)发生还原胺化反应。
特点:常用于寡糖定量分析,结合HPLC/UPLC检测。
2. 氨基化后标记法
先引入氨基功能团(胺化葡聚糖),再与FITC、Cy5等活性酯荧光探针反应。
常用染料:FITC、AF488-NHS、Cy5-NHS。
3. 商业化现成产品
FITC-Dextran(分子量范围 4kDa、10kDa、40kDa、70kDa、500kDa等),用于细胞内吞、血管渗透、成像研究;
TRITC-Dextran、Texas Red-Dextran:用于红色通道;
Cascade Blue-Dextran、AF647-Dextran:适合共聚焦多重染色。
二、荧光标记菊粉(Fluorescent Inulin)
【基本信息】
菊粉(Inulin)是由果糖单位组成的天然中性多糖,广泛用于研究肾小球滤过率(GFR)、肠道吸收、肠道菌群发酵研究。
【标记技术】
由于菊粉缺乏原生反应性基团,标记难度高于葡聚糖,常采用以下策略:
1. 羧基引入后偶联
将菊粉通过顺丁烯二酸酐、氯乙酸等引入羧基;
再通过EDC/NHS法偶联胺类荧光团如FITC-EDA、Cy5-Amine。
2. 异氰酸酯标记法(较少使用)
在碱性条件下,羟基可缓慢与FITC等异氰酸酯发生反应,需优化反应温度与时间。
3. 点击化学标记法
菊粉首先引入炔基或叠氮基,通过CuAAC或无铜点击反应连接荧光团;
稳定性好,适用于体内实验。
4. 应用实例
FITC-Inulin:用于评估小动物肾功能;
TRITC-Inulin:体内血液循环示踪;
Cy5-Inulin:用于深部组织红外成像或肠道分布研究。
三、荧光标记透明质酸钠(Fluorescent Sodium Hyaluronate)
【基本信息】
透明质酸钠(Sodium Hyaluronate,HA)是一种天然阴离子多糖,由葡萄糖醛酸和N-乙酰葡萄糖胺构成,是重要的细胞外基质成分,常用于构建靶向递送系统、生物医用材料。
【标记技术】
1. 羧基活化标记法
HA本身具有丰富的–COOH,可直接用EDC/NHS与胺类荧光探针偶联(如FITC-EDA, AF647-Amine);
反应温和、偶联效率高;
可控制标记度,避免荧光淬灭。
2. 还原端标记法
适用于低分子量HA寡糖;
使用2-AB等还原胺法用于糖链分布分析。
3. 叠氮化标记法(点击化学)
在HA上引入叠氮基(HA-N₃),与含炔基的荧光探针点击反应;
无金属反应体系(SPAAC)适合细胞与活体实验。
4. 商品化实例
FITC-HA(5 kDa~500 kDa):用于细胞内吞、CD44靶向验证;
Cy5-HA、Cy7-HA:用于肿瘤靶向成像、深部组织荧光观察;
AF488-HA:流式检测HA与细胞相互作用。
四、总结与定制服务
项目 | 葡聚糖 | 菊粉 | 透明质酸钠 |
---|---|---|---|
可修饰基团 | –OH(可胺化) | –OH(低反应性) | –COOH(天然存在) |
常用标记方法 | FITC、TRITC、AF488 | 羧基引入+FITC/Cy5 | EDC/NHS+胺类探针,点击化学 |
商品分子量范围 | 4kDa~2MDa | 1kDa~10kDa | 5kDa~1000kDa |
应用方向 | 血管通透、细胞内吞、载体模型 | 肾功能检测、肠道追踪 | 靶向载体、生物成像、组织修复 |
关于我们:
西安齐岳生物提供的荧光标记服务支持糖化学、蛋白质、多肽、抗体、核酸及纳米材料等多种生物分子的荧光化修饰。可提供多种荧光探针(如FITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor系列、ICG等),根据应用场景(流式细胞、共聚焦、活体成像等)选择合适波长及标记方式。服务包含标记反应、纯化、标记率评估及质量验证,确保分子活性和信号强度。适用于细胞追踪、分子成像、靶向验证等研究,亦可提供定制荧光强度、pH响应或近红外探针功能化服务。
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