Fluorescein Tyramide 是一种结合了荧光染料 荧光素(Fluorescein) 与 Tyramide Signal Amplification (TSA) 技术的荧光标记试剂。它广泛用于生命科学领域,尤其在需要检测低丰度靶标的实验中,如免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)、荧光原位杂交(FISH)、Western blot 等。
英文名 Fluorescein tyramide
CAS号 210236-90-1
分子量 495.49
分子式 C29H21NO7
化学组成与结构
1. Fluorescein(荧光素)
激发波长:约 490 nm
发射波长:约 515 nm(发绿色荧光)
优点:亮度高、量子产率高、易检测、与多种设备兼容。
缺点:对光敏感,相对容易光漂白;在某些组织中可能存在背景自发荧光。
2. Tyramide(酪胺)
苯酚类化合物,能被辣根过氧化物酶(HRP)催化活化。
活化后生成高度活泼的自由基,可与靶标附近蛋白质的酪氨酸残基共价结合。
这种共价结合使信号牢固沉积在靶标位置,带来极高的信号放大效果。
应用领域
免疫组化(IHC)与免疫荧光(IF)
检测组织或细胞中的低表达蛋白质。
在多重染色实验中与其他波长染料搭配使用。
荧光原位杂交(FISH)
放大探针信号,实现高灵敏度核酸检测。
应用于基因定位、染色体异常检测、拷贝数变异分析等。
Western blot
提高蛋白检测灵敏度。
尤其在目标蛋白丰度低时发挥关键作用。
细胞成像与组织成像
fluorescein 发射绿色荧光,适合常规荧光显微镜观察。
适用于冷冻切片、石蜡切片或培养细胞。
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