荧光标记氨基酸定制技术
一、概述
氨基酸的荧光标记广泛应用于蛋白质动态追踪、代谢示踪、酶活分析、信号路径研究等。通过对天然氨基酸或其衍生物进行荧光修饰,可构建荧光探针、标记底物或模拟肽链。
二、定制技术流程
1. 氨基酸前体选择
天然氨基酸如:Lys(有–NH₂)、Cys(有–SH)、Asp/Glu(有–COOH)
衍生化氨基酸(Fmoc-AAs、Boc-AAs等)
2. 荧光染料与连接方式
FITC → 反应Lys上的–NH₂
NHS-Rhodamine/Cy5 → 胺基偶联
Maleimide类荧光染料 → 与Cys-SH反应
EDC/NHS法 → 用于氨基与羧基之间的偶联
3. 反应条件
水或DMF体系反应
pH控制在 7.4–8.5 之间
反应时间:1~12小时,避光
4. 纯化与分析
纯化方式:透析、HPLC、层析
分析方法:MALDI-TOF、荧光光谱、NMR、MS
三、应用
荧光氨基酸用于体内代谢示踪
荧光氨基酸修饰多肽构建FRET探针
蛋白质定向修饰或活性检测
四、推荐试剂
试剂 | 功能 |
FITC、NHS-Cy5 | 主流荧光标记物 |
L-Lysine、Cys、Fmoc-Lys(Boc)-OH | 常用氨基酸底物 |
DMF、HEPES | 溶剂体系 |
EDC、NHS | 酰胺键催化剂 |
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司专注于功能化玻片,脂质体,纳米材料,荧光材料,peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素类试剂、共聚物及光电功能材料等各种科研材料的定制合成服务。
以上资料由齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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