蛋白偶联肽定制技术(Protein–Peptide Conjugation)
1. 技术背景
蛋白偶联肽是通过化学或酶促手段将功能性多肽与天然蛋白(如BSA、HSA、OVA、KLH、抗体、酶等)进行共价偶联,以赋予肽分子免疫原性、靶向性或增强其生物学功能。该类偶联物广泛用于疫苗开发、抗体制备、诊断试剂、生物传感与药物递送系统等领域。
2. 可偶联蛋白种类
蛋白类型 | 常用示例 | 应用方向 |
载体蛋白 | BSA、OVA、KLH、HSA | 抗原设计、疫苗佐剂 |
酶类蛋白 | HRP、AP、GFP | 成像标记、活性追踪 |
抗体类蛋白 | IgG、Fab | 靶向递送、免疫组化 |
信号蛋白 | TGF-β、EGF | 生物活性增强 |
受体蛋白 | Integrin、CD分子 | 细胞靶向、细胞摄取 |
3. 常用偶联方式
偶联策略 | 基团要求 | 连接化学 | 特点 |
EDC/NHS | -COOH 与 -NH₂ | 酰胺键 | 经典、稳定 |
戊二醛交联 | -NH₂ 与 -NH₂ | 醛胺缩合 | 温和、广谱 |
Maleimide–thiol | -SH 与 -Mal | Michael 加成 | 高选择性 |
Click 化学 | -N₃ 与 -C≡CH | Huisgen 环化 | 正交、高效 |
碘代酰胺法 | 半胱氨酸位点标记 | 特异修饰 | 精准定位 |
4. 多肽设计要求
接头设计:常加入Gly-Gly、PEG₃等作为柔性桥梁
功能位点暴露:避免关键位点被偶联影响
端基修饰:如在N/C端引入Cys、Lys等偶联位点
5. 偶联流程
多肽合成(SPPS):带特定修饰基团
蛋白激活/修饰:通过NHS化、Mal化、碘化处理
偶联反应条件优化:
缓冲:PBS、MES、Borate等
温度:常温或4℃反应
比例:通常肽:蛋白=10:1 ~ 100:1
纯化与验证:
透析、SEC除去游离肽
SDS-PAGE、质谱确认偶联
6. 应用示例
OVA-RGD肽:用于T细胞活化模型
BSA-多肽抗原:制备单克隆抗体
IgG-穿膜肽:细胞靶向递送药物
HRP-标记肽:ELISA检测系统
产地:西安齐岳生物
用途:科研
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司专注于功能化玻片,脂质体,纳米材料,荧光材料,peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素类试剂、共聚物及光电功能材料等各种科研材料的定制合成服务。
以上资料由齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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