KLH 偶联多肽定制技术（Keyhole Limpet Hemocyanin–Peptide Conjugation）

1. 技术概述

KLH（钥孔鲍血蓝蛋白，Keyhole Limpet Hemocyanin）是一种高分子量、免疫原性很强的载体蛋白，广泛用于疫苗开发、抗体制备和免疫原增强研究中。由于其非哺乳动物来源、结构复杂、强大的免疫佐剂效果，KLH 被常用于与小分子多肽偶联形成高免疫原复合物，从而诱导体内强烈的免疫反应。

2. KLH 的类型

常见的KLH产品包括两种形式：

原生KLH（native KLH）：大分子聚合体，适合用作疫苗或免疫佐剂。

分离KLH（subunit KLH）：单体形式，分子量较低，更稳定，适用于实验室偶联反应。

3. 多肽-KLH 偶联原理

KLH本身含有大量赖氨酸残基（-NH₂），因此可通过如下几种化学方式与多肽偶联：

A. EDC/NHS酰胺键偶联

条件：多肽带有羧基，KLH含有氨基

工艺：EDC活化羧基 → NHS稳定中间体 → 与KLH反应形成酰胺键

B. 戊二醛交联

条件：多肽和KLH都带氨基

机理：形成 Schiff 碱结构，随后还原稳定

C. 马来酰亚胺/巯基桥接

条件：多肽含有半胱氨酸（-SH）

工艺：先将KLH通过马来酰化处理，再与多肽巯基偶联

D. 点击化学偶联

条件：多肽修饰叠氮或炔基，KLH接入对端官能团

特点：高效率、低副反应，适合高精度定向偶联

4. 定制流程

多肽序列合成：可添加C端或N端巯基、羧基、连接桥臂（如PEG）

选择偶联方式：根据结构和用途确定EDC/NHS、戊二醛或点击化学

偶联反应条件优化：

缓冲液：MES、PBS、Borate等

温度：常温或4°C

比例：一般多肽:KLH = 10:1~100:1

纯化与验证：

透析、离心过滤去除游离多肽

SDS-PAGE、电泳确认偶联成功

蛋白浓度检测与偶联效率分析

5. 应用方向

制备抗多肽抗体（常用作抗原）

肿瘤疫苗、抗体药物前体

自身免疫病模型诱导

佐剂增强疫苗开发（如HPV、肿瘤肽疫苗）

产地：西安齐岳生物

用途：科研

关于我们：

西安齐岳生物科技有限公司专注于功能化玻片，脂质体，纳米材料，荧光材料，peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素类试剂、共聚物及光电功能材料等各种科研材料的定制合成服务。

以上资料由齐岳生物小编zhn提供，仅用于科研

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