半乳糖苷化修饰氧化酶定制技术(Galactosylation of Oxidase Enzymes)
一、技术背景
氧化酶类(如葡萄糖氧化酶、胆固醇氧化酶等)在生物传感器、肿瘤治疗与代谢调节中广泛应用。通过半乳糖苷化修饰其表面,可增强其在肝脏的特异性识别与靶向富集,同时赋予其一定的稳定性及免疫屏蔽能力。
二、修饰路径
1. 醛基还原胺化法
将D-半乳糖预氧化生成醛基(NaIO₄);
氧化酶表面的赖氨酸残基可与醛基形成C=N;
加入NaBH₃CN将席夫碱还原为稳定C–N键。
此法温和,适用于大多数蛋白酶类修饰。
2. 活性酯交联法
使用半乳糖酸或带羧基的半乳糖衍生物;
经EDC/NHS活化,与酶表面氨基反应;
保留酶活的同时引入半乳糖定位基团。
3. PEG连接器法
将Gal通过PEG链连接,再通过马来酰亚胺-SH键或活性酯接入酶表面;
可增加酶稳定性与循环半衰期;
支持同时多点修饰,兼容其他修饰(荧光、放射探针等)。
三、修饰评价
SDS-PAGE验证分子量变化;
ELISA或FITC-Gal检测表面糖链表达;
保留酶催化活性(GOx比活下降<15%为佳);
ASGPR阳性细胞摄取试验。
四、应用方向
肝靶向代谢调节(如GOx调控葡萄糖浓度);
智能响应生物传感器(Gal-Ox@Au电极);
肿瘤微环境调节剂(Gal-GOx释放H₂O₂);
肝细胞特异性成像(Gal-Ox@探针);
产地:西安齐岳生物
用途:科研
以上资料由齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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