荧光标记葡聚糖(AF染料-Dextran)定制技术
一、技术概述
葡聚糖(Dextran)是一种天然葡萄糖多糖,结构柔顺,生物相容性好,常用作分子探针载体、血容量膨胀剂、药物修饰载体等。通过与Alexa Fluor(AF)系列荧光染料结合,可实现高稳定性、低自荧光、高亮度的葡聚糖荧光标记。
二、标记原理
葡聚糖主链含大量羟基基团,但羟基与多数染料不活泼,因此通常先将其氧化生成醛基,再与染料反应,或采用预活化的AF羧酸/NHS酯进行接枝。
三、常用标记方法
方法一:钠高碘酸(NaIO₄)氧化 + 邻苯二胺还原法
葡聚糖在水中加入NaIO₄,常温反应2 h,生成醛基;
加入 AF-NH₂(如AF488-NH₂、AF647-NH₂);
加入NaBH₃CN还原醛胺,形成稳定共价连接;
透析去除游离染料。
方法二:AF-NHS 酯直接标记氨基化葡聚糖
若预先将葡聚糖氨基化(Dextran-NH₂),可直接与 AF-NHS 酯反应:
缓冲液:pH 8.3 NaHCO₃;
温度:室温,避光反应 2–4 h;
常用染料:AF488-NHS, AF594-NHS, AF647-NHS。
四、纯化与表征
透析或柱层析去除游离染料;
UV-Vis、荧光光谱检测标记率;
GPC-HPLC检测分子量分布;
稳定性测试:37°C、血清中24 h无漂移。
五、应用领域
分子示踪与成像(微血管渗透性);
纳米载体修饰与光热协同治疗;
免疫学与生理学中追踪大分子扩散。
产地:西安齐岳生物
用途:科研
以上资料由齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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