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荧光标记多肽底物定制技术-西安齐岳生物
发布时间:2025-07-10     作者:zhn   分享到:

荧光标记多肽底物定制技术

一、概述

荧光标记多肽底物是一类在蛋白酶活性检测、信号通路分析、细胞成像等方面应用广泛的功能化分子探针。通过在多肽链N端或C端共价连接荧光团,可用于FRET探针、酶切底物、细胞摄取评价等。

 

二、定制技术路线

1. 多肽合成(固相合成法)

采用Fmoc固相合成策略:

使用氨基树脂载体合成目标序列;

控制链长(5~30个氨基酸残基);

高纯度(>95%)通过HPLC纯化;

特异性酶切位点设计(如DEVD、RRR等)。

2. 荧光修饰

常用荧光染料:

FITC(异硫氰酸荧光素)

Cy3/Cy5、FAM、TAMRA、Alexa Fluor 系列

可设计为FRET对(如FAM-TAMRA)

修饰位点选择:

N端氨基直接标记;

C端通过链接臂引入;

中间加入连接臂或降解位点(PEG linker、酶切位点)

3. 接头设计与双标记技术

使用Lys侧链氨基或Cys巯基引入荧光标记;

可构建酶响应型FRET结构,用于荧光开关探针;

连接肽段与多肽探针之间通过PEG链柔性连接。

 

三、定制参数与服务内容

项目

说明

多肽长度

5–30 aa

荧光染料

FITC, TAMRA, Cy5, Alexa Fluor 等

修饰位点

N端、C端、Lys侧链等

酶响应性

可设计为MMP、Caspase、Trypsin等识别底物

纯度标准

>95%,MS鉴定/HPLC报告

交付形式

冻干粉/水溶液,带完整说明书

 

四、应用方向

荧光成像探针:用于细胞摄取或定位研究;

酶活性检测:如Caspase-3、MMP活性评估;

FRET探针:用于蛋白交互研究;

信号转导路径研究:作为底物筛选工具。

 

荧光标记多肽底物定制技术

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