荧光标记修饰蛋白质技术定制
1. 技术背景
荧光标记蛋白质在生物成像、定量检测、细胞追踪及药物递送监控中有广泛应用。通过共价键或特异性结合将荧光分子与蛋白连接,有助于实现可视化跟踪和功能分析。
2. 常用荧光染料
有机荧光染料:FITC(异硫氰酸荧光素)、TRITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor 系列等。
荧光团修饰剂:如 NHS 酯(胺反应)、马来酰亚胺(巯基反应)、异硫氰酸酯。
量子点标记:适用于长时间跟踪,高光稳定性。
3. 蛋白质反应位点
赖氨酸残基-NH₂:与NHS酯反应形成酰胺键。
半胱氨酸残基-SH:与马来酰亚胺类标记物形成硫醚键。
羧基-COOH:通过EDC/NHS活化与荧光胺反应。
位点特异性标记:通过遗传工程或标签引入如His-tag、Cys标签。
4. 标记步骤
缓冲液优化:如碳酸盐缓冲液、PBS,pH 7.4–9.0。
荧光染料预处理:溶于DMSO、DMF等无水溶剂。
反应与孵育:避光反应,通常1–3 h。
除去游离染料:透析、凝胶过滤、离心等方式。
标记率测定:通过紫外-可见光谱法(280 nm/荧光波长)。
5. 应用场景
BSA-FITC 蛋白追踪
HSA-Cy5 药物递送可视化
GFP融合蛋白动态成像
抗体-FITC 用于流式细胞术(FACS)
产地:西安齐岳生物
用途:科研
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司专注于功能化玻片,脂质体,纳米材料,荧光材料,peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素类试剂、共聚物及光电功能材料等各种科研材料的定制合成服务。
以上资料由齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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