异硫氰酸荧光素标记甘氨鹅去氧胆酸(FITC-GCDCA)定制技术
1. 简介
甘氨鹅去氧胆酸(Glycochenodeoxycholic acid, GCDCA)是一种结合了甘氨酸和鹅去氧胆酸的结合型胆汁酸,在胆汁酸代谢、胆汁酸受体研究及肠肝循环相关课题中具有重要意义。通过与异硫氰酸荧光素(FITC)标记,可实现其荧光示踪功能,便于在细胞摄取、药代动力学或受体结合研究中的应用。
2. 合成原理
FITC是一种具有异硫氰酸基团(–N=C=S)的荧光团,能与氨基化合物中的伯胺(–NH₂)反应形成稳定的硫脲键。GCDCA中包含甘氨酸结构单元,该部分提供了反应位点。
3. 反应流程简述
步骤一:将GCDCA溶解于弱碱性水溶液或DMSO中,使氨基处于游离状态;
步骤二:将FITC以摩尔过量缓慢加入反应混合物;
步骤三:维持pH在8.5左右,于4\~12小时内进行偶联反应;
步骤四:反应完成后通过透析或HPLC纯化产物,去除多余的FITC和副产物;
步骤五:冷冻干燥并表征(UV-vis、荧光、质谱、HPLC等)。
4. 定制注意事项
GCDCA的氨基暴露程度影响标记效率,可能需对其结构位点进行优化;
FITC对光敏感,需避光操作;
可以使用碳二亚胺(如EDC)辅助活化羧基形成中间体,提高反应效率;
产物的稳定性与pH相关,推荐在pH 6\~7条件保存。
5. 应用场景
荧光追踪GCDCA的摄取、转运路径;
胆汁酸受体(如FXR、TGR5)结合位点筛选;
微生物胆汁盐水解酶(BSH)研究;
药物递送系统胆汁酸衍生靶向验证。
规格:mg与g级别
产地:西安齐岳生物
用途:科研
以上资料由齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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