CY5.5-Streptavidin(花菁染料CY5.5标记链霉亲和素)
中文名称:花菁染料 CY5.5 标记链霉亲和素
英文名称:Cy5.5-Streptavidin
一、背景概述
链霉亲和素(Streptavidin)是一种与生物素(Biotin)具有强非共价亲和力的四聚体蛋白,结合常数高达 10^(-14) mol/L。通过将近红外花菁染料 Cy5.5 标记至链霉亲和素上,构建出用于生物素化分子检测的荧光探针,广泛用于:
荧光免疫组化与原位杂交(FISH);
活体动物光学成像;
微阵列芯片检测;
荧光追踪与结合动力学研究;
荧光信号放大系统(如SAB技术)。
二、技术核心与结构设计
Cy5.5 是一种近红外荧光染料,激发峰约 675 nm,发射峰约 694–705 nm。其 NHS 酯活性基团可与蛋白分子上的游离赖氨酸残基(-NH₂)通过酰胺键偶联形成稳定的标记复合物。
分子结构图组成(简要):
Streptavidin(分子量约 60 kDa)
Cy5.5-NHS(1–3 个标记/分子)
标记参数:
*佳 DOL(Degree of Labeling)为 1.5–2.5;
过度标记将影响亲和力或荧光性能;
标签稳定,不影响与生物素结合活性。
三、合成路线概述
反应准备:将链霉亲和素溶于 pH 8.5 的碳酸盐缓冲液(如 0.1 M NaHCO₃);
加入Cy5.5-NHS:以1.5–5 eq 计量加入溶液;
反应条件:室温避光反应 30–60 分钟;
纯化:通过超滤(10 kDa 截留)或凝胶层析(如 Sephadex G-25)去除游离染料;
检测纯度:UV-Vis 分析 Cy5.5(λ=675 nm)与蛋白(λ=280 nm)比值,计算 DOL;
冻干储存:冻干后可长期保存于 -20°C 干燥环境中。
四、应用场景
肿瘤靶向示踪:与生物素修饰抗体或aptamer结合;
分子光学成像:用于小鼠体内肿瘤、淋巴结等组织示踪;
荧光染色:对组织切片中目标分子进行可视化检测;
蛋白芯片/ELISA扩展应用:替代HRP系统,获得高分辨率图像;
信号放大:与双生物素探针协同,增强靶点检测灵敏度。
五、定制参数
项目 | 支持说明 |
DOL 控制 | 可指定标记度(如 1.0、2.0、3.0) |
缓冲体系 | PBS、Tris、HEPES、NaHCO₃ 等均可适配 |
交联类型 | NHS 酯类(默认),也可定制马来酰亚胺(适用于半胱氨酸标记) |
染料替换 | 可改为 Cy5、Cy7、IRDye800、Alexa 系列 |
多功能耦联 | 可进一步加入 PEG 链、生物素或点击化学基团 |
交付形式 | 液体冻存或冻干粉末,附带说明书与标签图谱 |
产地:西安齐岳生物
用途:科研
以上资料由西安齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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