荧光标记胆固醇衍生物定制技术
一、概述
胆固醇是类固醇脂质的重要代表,广泛参与生物膜构建、脂质体系统和类脂体药物传递中。将胆固醇进行荧光标记(如FITC、Rhodamine、Cy5等),可用于细胞膜动态成像、胆固醇代谢追踪、纳米载体行为研究等。
二、定制合成技术流程
1. 胆固醇衍生物设计
常见的可标记胆固醇衍生物包括:
胆固醇-羧酸(Chol-COOH)
胆固醇-氨基(Chol-NH₂)
胆固醇-羟基(Chol-OH)
其中Chol-NH₂ 和 Chol-COOH 是荧光偶联的理想前体。
2. 选择荧光染料及官能团
常用荧光标记物及其反应基团:
FITC(异硫氰酸荧光素) → 反应氨基
NHS-Cy5/Cy3 → 酰胺键连接氨基
Rhodamine B Isothiocyanate → 与氨基反应
Fluorescein-NHS ester → 与胆固醇-氨基共轭
3. 偶联反应过程
溶剂:DMSO、DMF、乙腈
缓冲液:碳酸盐缓冲液(pH 8.0–9.0)
温度:室温或4°C,避光搅拌 12–24 h
摩尔比:胆固醇:荧光基团 = 1:1.2(建议适当过量荧光染料)
4. 纯化与表征
TLC或HPLC用于去除未反应荧光素
质谱、NMR、UV-Vis、荧光光谱进行结构和性能确认
三、应用示例
胆固醇转运示踪实验(细胞膜摄取)
脂质体中胆固醇行为研究
胆固醇修饰纳米粒追踪定位
四、常用试剂推荐
名称 | 用途 |
FITC、NHS-Cy5 | 荧光标记剂 |
Cholesterol-NH₂、Chol-COOH | 标记前体 |
DMSO、碳酸盐缓冲液 | 溶剂系统 |
Sephadex G25柱 | 脱盐纯化 |
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司专注于功能化玻片,脂质体,纳米材料,荧光材料,peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素类试剂、共聚物及光电功能材料等各种科研材料的定制合成服务。
以上资料由齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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