FITC-Hemoglobin(绿色荧光素标记血红蛋白)定制合成技术
技术概述
FITC(荧光素异硫氰酸酯)是一种广泛应用于蛋白质标记的绿色荧光染料,可与蛋白质中的**胺基(主要为赖氨酸残基)特异性共价结合。将FITC与血红蛋白(Hb)**偶联,不仅能实现Hb在体内的可视化追踪,也可用于氧输运研究、光热治疗载体标记、蛋白转运示踪等方向。
合成工艺流程
1. 材料准备
血红蛋白(人源/牛源)
FITC(溶于DMSO或碳酸盐缓冲液)
缓冲液:0.1 M 碳酸氢钠缓冲液,pH 9.0
2. FITC标记反应
将Hb溶解于碳酸盐缓冲液中(1–10 mg/mL)。
加入FITC溶液(摩尔比FITC:Hb ≈ 10:1),避光反应4–12 h,温度控制在4°C。
反应过程中适时搅拌,防止蛋白沉淀。
3. 分离纯化
使用Sephadex G-25凝胶过滤柱或超滤(10 kDa膜)去除未结合的FITC。
可通过透析进一步去除小分子。
4. 标记效率评估
使用紫外-可见光分光光度计检测280 nm(蛋白)和495 nm(FITC)吸收。
计算标记度:FITC/Hb摩尔比
可使用荧光光谱(λ_ex=495 nm, λ_em=519 nm)确认荧光性能。
5. 储存条件
避光、4°C保存于PBS或HEPES中,避免反复冻融。
技术亮点
FITC标记保留Hb结构和功能,适用于活体成像、细胞摄取研究。
工艺温和,适合大规模生物标记制备。
可拓展为氧释放可视化研究平台。
产地:西安齐岳生物
用途:科研
西安齐岳生物是一家在生物科技领域深耕细作、成果斐然的企业。公司拥有富有创新精神的科研团队,他们凭借深厚的专业知识和丰富的实践经验,不断探索生物科技的前沿领域。在产品方面,西安齐岳生物涵盖了生物试剂、化学试剂、纳米材料等众多品类。这些产品性能稳定,广泛应用于科研院校的课题研究、医药企业的药物研发以及工业生产的检测分析等多个场景,为推动相关领域的发展提供了有力支持。
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