产品名称：Cy5标记生物素聚乙二醇，Cy5-PEG-Biotin的实验注意事项

实验注意事项

合成条件控制

无水环境：Cy5的活性酯基团易水解，反应需在无水条件下进行，避免使用含水的溶剂或缓冲液。

避光操作：Cy5对光敏感，合成及使用过程需在暗处或黄光下进行，防止荧光淬灭。

pH控制：酰胺化反应需在弱碱性条件（pH 8.0-9.0）下进行，确保反应效率。

纯化与表征

初步纯化：采用透析法（截留分子量合适的透析袋）去除小分子杂质和过量多肽。

深度纯化：通过反相高效液相色谱（RP-HPLC）或凝胶渗透色谱（GPC）分离目标产物，收集纯度达90%以上的组分。

结构验证：利用质谱（MS）、核磁共振氢谱（¹H NMR）及红外光谱（FT-IR）确认产物结构与纯度。

细胞与动物实验

细胞毒性测试：通过MTT或CCK-8 assay评估材料对正常细胞（如HEK293）的毒性，确保生物相容性。

活体实验安全性：小鼠静脉注射剂量建议为1-5 mg/kg，需监测生物安全性（如肝肾功能、血钙水平）。

标记效率验证：通过荧光光谱法或流式细胞术测定标记后细胞或载体的荧光强度，确认标记效率（通常需>80%）。

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