半乳糖化重组人生长激素(Gal-rhGH)
1. 背景目的
重组人生长激素(r-hGH)是具有多种疗效的生物制剂,如促生长、调节代谢。半乳糖化可改善其代谢半衰期,并增强肝脏靶向,提高体内疗效及减少免疫原性。
2. 分子修饰方式
酶法糖基化:利用核心结构酶(如乳糖转移酶)在r-hGH表面引入半乳糖残基;
化学接枝:通过表面赖氨酸侧链上的–NH₂与Gal-NHS偶联生成酰胺键。
3. 合成流程
A. 酶促法
将r-hGH在缓冲液中与乳糖转移酶、UDP-Gal底物共反应;
37 ℃、pH 7~8,反应4–12小时;
利用超滤或离心除去酶与底物,获取Gal-rhGH。
B. 化学接枝法
配制Gal-COOH,活化为Gal-NHS酯;
与r-hGH在PBS缓冲液中(pH 7.5–8)反应2–4小时;
透析或GPC去除游离小分子,冷冻干燥;
4. 纯化与表征
SDS-PAGE与Western blot鉴定蛋白大小及糖基化位点;
MALDI-TOF或LC-MS测定糖基化程度;
ELISA方法检测hGH活性;
生物测试:促细胞增殖实验、IgG结合评估免疫原性。
5. 应用优势
延长在体半衰期,降低给药频率;
定向肝脏靶向提效,可应用于代谢病、脂肪肝治疗;
减少免疫性反应,安全性增强;
可衔接PEGysation、Fc融合增强稳定性。
规格:mg与g级别
产地:西安齐岳生物
用途:科研
以上资料由齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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