KLH偶联多肽定制技术
KLH(Keyhole Limpet Hemocyanin,钥孔鱼血蓝蛋白) 是一种高免疫原性的大分子蛋白,常作为多肽抗原载体应用于疫苗研发、抗体制备及免疫分析。通过将小分子肽段共价偶联至KLH上,可大幅提高其免疫原性,诱导机体产生特异性免疫应答。
1. 常用偶联策略
a. EDC/NHS缩合反应(胺-羧酸)
利用多肽上的氨基与KLH蛋白上的羧基反应;
常用于含有赖氨酸残基或N末端胺的肽。
b. 巯基-马来酰亚胺法
多肽引入C末半胱氨酸(Cys),与马来酰亚胺修饰的KLH反应;
特异性高,结构稳定,不影响KLH主链功能。
c. Click反应(少用于KLH,偶联效率高但需反应条件优化);
2. KLH类型与处理
原生KLH(Native KLH):多用于免疫实验;
KLH载体化修饰型:如Succinylated-KLH、Maleimide-KLH;
一般先活化KLH,再加入肽段进行定向偶联;
完成后进行透析或离心超滤去除游离肽段。
3. 定制流程
合成含C端-Cys的肽段或赖氨酸多肽;
使用Sulfo-SMCC等交联剂将KLH进行马来酰亚胺化;
进行偶联反应(温和条件,4℃避光);
透析纯化,HPLC或PAGE验证偶联效率;
可提供偶联率(负载密度)检测报告。
4. 应用方向
抗体制备:如多肽抗原制备多克隆抗体(pAb)或单抗;
疫苗开发:如肿瘤新抗原肽-KLH疫苗;
免疫检测标准物:偶联肽用于ELISA包被抗原。
5. 定制选项
KLH载体选型:Native KLH / Maleimide-KLH;
偶联密度控制(低/中/高);
支持与OVA/BSA对照偶联;
可同时提供肽-HSA、肽-BSA等多载体版本。
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司专注于功能化玻片,脂质体,纳米材料,荧光材料,peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素类试剂、共聚物及光电功能材料等各种科研材料的定制合成服务。
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