荧光标记修饰靶向肽定制技术
靶向肽(如RGD、GE11、F3、LyP-1等)能高亲和力识别特定细胞表面受体(如Integrin αvβ3、EGFR、nucleolin等),在药物递送、成像探针、细胞识别中应用广泛。通过荧光标记,可实现对肽在体内/体外行为的可视化监测。
1. 常用荧光染料种类
类型 | 波长范围 | 特点 |
FITC(异硫氰酸荧光素) | Ex/Em ≈ 495/520 nm | 常用,价格低,易连接 |
Cy系列(Cy3/Cy5/Cy7) | Ex/Em ≈ 550–800 nm | 明亮、信噪比高,适合活体成像 |
Rhodamine B/TRITC | 550–600 nm | 稳定性好 |
ICG(吲哚菁绿) | ≈ 780/810 nm | 近红外成像、穿透力强 |
Alexa Fluor 系列 | 多波段,稳定性佳 | 适用于细胞和动物成像 |
2. 标记策略
a. N-末端标记
将荧光染料(如FITC-NHS、Cy5-NHS)与多肽N端氨基发生酰胺键偶联;
优点:反应高效,不干扰侧链活性。
b. C-端/赖氨酸侧链标记
靶向位点定制控制,避免影响受体结合位点;
使用修饰氨基酸位点选择性标记。
c. Click化学标记
炔基化多肽与叠氮荧光团反应;
选择性好、位点精准,适合复杂多肽体系。
d. 双标/多标
引入多个赖氨酸或PEG支链后加载不同染料;
可实现FRET或多通道成像。
3. 合成流程(以FITC标记为例)
多肽固相合成完成后,保留N端或Lys侧链氨基;
在弱碱缓冲液中加入FITC,避光搅拌数小时;
反应后纯化(HPLC);
验证荧光强度、纯度(UV、质谱、荧光光谱);
4. 应用领域
活细胞靶向成像(RGD-FITC, GE11-Cy5等);
肿瘤组织识别;
靶向载体构建(如靶向脂质体/纳米粒);
荧光探针(与金属离子或受体反应);
流式检测、共聚焦显微成像。
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司专注于功能化玻片,脂质体,纳米材料,荧光材料,peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素类试剂、共聚物及光电功能材料等各种科研材料的定制合成服务。
以上资料由齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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