酶响应荧光脂质体定制技术

一、技术概述

酶响应荧光脂质体利用肿瘤或病灶微环境中高表达的酶（如MMPs、PLA2、Cathepsin B等）作为触发机制，在特定酶的作用下裂解脂质体中的响应结构，导致药物释放和荧光激活。此类系统可实现**“靶向释放 + 成像”双功能化**。

二、设计原理

酶识别序列引入： 利用肽链或脂质连接酶切识别位点（如PLGVR、GFLG、GPLGIAGQ），可被特定酶裂解。

荧光设计： 荧光染料与猝灭剂/磷脂共存在膜内，酶切后荧光恢复或释放探针（“off-on”型）。

常见酶类别：

基质金属蛋白酶（MMP-2/9）： 切割特定肽序列

磷脂酶A2（PLA2）： 切断脂肪酰键，破坏膜结构

半胱天冬酶（Cathepsin B）： 溶酶体高表达，裂解GFLG结构

三、定制工艺

脂质材料选择：

DSPE-PEG-peptide（含酶识别位点）

DSPC/DOPE/Chol（构建脂质体骨架）

DSPE-PEG-FRET结构：荧光染料+猝灭基团（FRET对）

酶敏位点构建：

合成酶响应脂质（如DSPE-PEG-GPLGIAGQ）

修饰药物前体（如酶切后释放的前药）

制备方式：

水合法+酶敏肽共混

微流控法提高批次一致性

可结合MMP诱导释放药物+荧光探针可视化

四、应用方向

肿瘤定位成像

智能前药递送系统

激活式探针释放

肿瘤精准治疗导航

五、常用试剂

DSPE-PEG-GPLGIAGQ（MMP响应）

DSPE-PEG-GFLG（Cathepsin B响应）

Cy5.5/QSY21、FAM/BHQ-1（FRET荧光对）

FITC、ICG、pHrodo（荧光标记）

PLA2敏感脂质（天然磷脂或合成酯类）