荧光标记修饰细胞膜囊泡技术(如外泌体)定制技术
1. 技术概述
细胞膜囊泡(如外泌体Exosome、微泡Microvesicles、膜纳米囊泡Nanovesicles)是天然来源的纳米载体,参与细胞间通信和药物递送。通过荧光标记这些囊泡,可实现体内外成像、分布追踪、摄取研究等目的。
2. 荧光染料类型与选择
膜荧光染料:DiI(红)、DiO(绿)、DiD(远红)、DiR(近红外)等。
亲脂性荧光素:PKH26、PKH67 等,嵌入脂双层。
荧光蛋白融合标记:如CD63-GFP/CD9-RFP,用于遗传修饰的细胞。
量子点标记:稳定性高,可长期成像。
3. 标记方法与流程
方法一:膜染法(直接掺染)
适用于DiI、DiO、PKH系列染料
步骤如下:
将纯化外泌体与染料工作液(PBS或稀释的Diluent)混合。
避光孵育 5–30 分钟。
用超滤管或超速离心去除未结合染料。
用PBS重悬,进行表征和应用。
方法二:融合蛋白法
构建表达荧光标记膜蛋白(如CD63-GFP)稳定细胞株。
收集其培养基提取外泌体,即获得内源性荧光囊泡。
无需二次标记,适合动态监控和长期实验。
方法三:生物素-亲和素法
表面修饰生物素后接荧光亲和素(如AF488-avidin),提升标记特异性。
4. 标记评价
粒径检测:DLS 或 NTA(纳米颗粒跟踪分析)。
荧光光谱:激发/发射峰与标记效率测定。
TEM/CLSM成像:验证荧光位置与结构保留性。
5. 应用示例
DiR-Exo体内荧光成像,观察外泌体在肝、肺、脑组织的分布。
PKH26外泌体用于肿瘤靶向运输可视化。
GFP-外泌体实时追踪巨噬细胞吞噬行为。
产地:西安齐岳生物
用途:科研
关于我们:
西安齐岳生物科技有限公司专注于功能化玻片,脂质体,纳米材料,荧光材料,peg衍生物、磁珠微球、蛋白、多肽、氨基酸、小分子、生物素类试剂、共聚物及光电功能材料等各种科研材料的定制合成服务。
以上资料由齐岳生物小编zhn提供,仅用于科研
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